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        【特別推薦】:高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)測定試劑使用說明、性能指標  
        發布者:idrfz.chen   
         

         (本試劑僅用于科研、實驗、技術支持,不直接用于臨床診斷)

        【簡介】

        用于全自動生化分析儀測定人體血清高密度脂蛋白膽固醇含量。

        高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)被認為是一種抗高脂血癥的抗冠心病和動脈粥樣硬化的體液因素,因此,HDL-C降低是冠心病重要的危險因素之一。通常情況下,HDL-C升高常見于原發性膽汁性肝硬變、慢性肝炎、乙醇中毒等病癥,而HDL-C降低則常見于冠心病、動脈粥樣硬化、糖尿病、腎臟疾病、肝臟疾病等病癥。

        【測定方法】

        直接清除法

        【測定原理】

        第一步,血清中含apoB的脂蛋白與試劑中的表面活性劑形成復合體,游離膽固醇等被清除;第二步,試劑加到反應混合物中后,HDL-C被裂解,HDL中的膽固醇與酶試劑反應并顯色。

        【試劑盒組成】

         

            

            

            

        試劑

        液體雙試劑

        試劑Ⅰ:試劑Ⅱ=31

        4-氨基安替比林、TOOS、工具酶等

        適量

        HDL-C校準品

        凍干1ml

        HDL-C

        見標簽

        【樣本要求】

        標本應空腹抽取,盡快分離血清,在冷藏(2-8)條件可穩定1周。標本如不能及時測定,應于-20保存,避免反復凍融。

        【測定步驟】

        1.本試劑為液體雙試劑,可直接使用。

        2.測定參數:波長:546nm;光徑:10mm;溫度:37。

        3.測定方法:

        加入物

        空白管

        標準管

        測定管

        試劑Ⅰ

        300

        300

        300

        蒸餾水(uL)

        3

        -

        -

        標準液(uL)

        -

        3

        -

        樣本(uL)

        -

        -

        3

        混勻,置37孵育5分鐘,讀取各管吸光度A1

        試劑Ⅱ(uL)

        100

        100

        100

        勻,置37保溫5分鐘,讀取各管吸光度A2,計算ΔA=A2-A1

        4.上機參數:

          

        37

        血清+R1反應時間

        300

        樣本量

        3uL

          

        546nm

        試劑Ⅰ

        300uL

          

        660nm

        試劑Ⅱ

        100uL

        血清+R1+R2反應時間

        300

        5.計算:

        HDL-C含量 mmol/L =  [(ΔA標本-ΔA空白)(ΔA標準-ΔA空白)]  × 校準品值

        【性能指標】

        1、 空白吸光度  0.05;

        2、 線性范圍 0-3.9mmol/L;

        3、 批內/分析內精密度  CV5%;批間相對極差 7%;

        4、 準確性  相對偏差不超過±10%。

        5、 抗干擾性  血清膽紅素<140μmol/L、TG<8.0mmol/L、血紅蛋白<5.0g/L、抗壞血酸<30mg/dL時,對測定無顯著影響。

        6、 方法對照  用本測定試劑和某進口HDL-C測定試劑測定100例血清HDL-C含量,結果顯示相關系數r = 0.990。

         

        【注意事項】

        1、試劑變混濁或空白吸光度值>0.05時,將不能使用,應棄去;

        2、建議各實驗室建立自己的正常值范圍;

        3、試劑與樣本量可根據需要按比例調節;

        4、請勿用嘴直接吸取試劑,避免接觸皮膚、眼睛及粘膜,一旦接觸,應即用水沖洗污染部位;

        5、使用配套的校準品校準,校準周期為30天,更換試劑批號時需要重新校準。建議使用正常值和病理值生化質控血清進行室內質控,測定的控制值應在確定的限制范圍內,若控制值失控,實驗室應采取適當的糾正措施。

        【參考范圍

        男性:>0.90mmol/L(>35mg/dl)  女性:>1.15mmol/L(>45mg/dl)

        建議各實驗室建立自己的正常參考值范圍。

        【儲存條件與有效期】

        未開封的試劑在2-8℃避光條件下可穩定12個月,置37℃水浴至少可穩定7天。

        試劑開封后,存放在分析儀試劑倉中(2-8)的試劑在30天內性質穩定。

        【參考文獻】

        1、Friedewald, W.T. et al., Clin.Chem. 18 (1972) 499

        2、Study Group, European Atherosclerosis Society, European Heart Journal, 8, (1987), 77 – 88

        3、Rifal, N., Warnick, G. R, Laboratory Measurement of Lipids, Lipoproteins and Apolipoproteins. AACC Press. Washington DC, USA 1994

        4、Burtis, C. A., Ashwood E. R., N. W. Tietz: Textbook of Clinical Chemistry, 2nd Edition, W. B. Saunders Company,Philadelphia 1994

        5、Gordon, T., Castelli, W. P., Hjortcand, M. C., Et Al Am. J. Med, 62, (1977), 707-714

         


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