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        【特別推薦】:低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)測定試劑使用說明、性能指標  
        發布者:idrfz.chen   
         

         (本試劑僅用于科研、實驗、技術支持,不直接用于臨床診斷)

        【簡介】

        用于全自動生化分析儀測定人體血清低密度脂蛋白膽固醇含量。

        動脈粥樣硬化(AS)斑塊中沉淀的脂質主要是低密度脂蛋白(LDL-C),在各類脂質中,LDL-C被認為是主要的致病因素,而高密度脂蛋白(HDL-C)可能起保護作用,血清總膽固醇(TC)大致反應LDL膽固醇(LDL-C)水平,但也受HDL-C水平的影響,因此在AS脂類危險因素判別中,TC偏高時,測定LDL-C有重要臨床意義。

        【測定方法】

        直接清除法

        【測定原理】

        第一步,試劑中的多聚體和非離子表面活性劑與LDL結合,選擇性地抑制LDL與膽固醇酶試劑反應,而膽固醇氧化酶(C0)和膽固醇酯酶(CE)與非 LDL脂蛋白(HDL,VLDL,CM)中的膽固醇反應,由于缺乏一個色源,Trinder反應不顯色。第二步,LDL-C與膽固醇酶試劑反應而顯色。

        【試劑盒組成】

         

            

            

            

        試劑

        液體雙試劑

        試劑Ⅰ:試劑Ⅱ=31

        4-氨基安替比林、TOOS、工具酶等

        適量

        LDL-C校準品

        凍干1ml

        LDL-C

        見標簽

        【樣本要求】

        標本應空腹抽取,盡快分離血清,在冷藏(2-8)條件可穩定1周。標本如不能及時測定,應于-20保存,避免反復凍融。

        【測定步驟】

        1.本試劑為液體雙試劑,可直接使用。

        2.測定參數:波長:546nm;光徑:10mm;溫度:37。

        3.測定方法:

        加入物

        空白管

        標準管

        測定管

        試劑Ⅰ

        300

        300

        300

        蒸餾水(uL)

        3

        -

        -

        標準液(uL)

        -

        3

        -

        樣本(uL)

        -

        -

        3

        混勻,置37孵育5分鐘,讀取各管吸光度A1

        試劑Ⅱ(uL)

        100

        100

        100

        混勻,置37保溫5分鐘,讀取各管吸光度A2,計算ΔA=A2-A1

        4.上機參數:

          

        37

        血清+R1反應時間

        300

        樣本量

        3uL

          

        546nm

        試劑Ⅰ

        300uL

          

        660nm

        試劑Ⅱ

        100uL

        血清+R1+R2反應時間

        300

        5.計算:

        LDL-C含量 mmol/L =  [(ΔA標本-ΔA空白)(ΔA標準-ΔA空白)]  × 校準品值

        【性能指標】

        1、 空白吸光度 0.05;

        2、 線性范圍0-12.9mmol/L;

        3、 批內/分析內精密度  CV5%;批間相對極差 7%;

        4、 準確性  相對偏差不超過±10%。

        5、 抗干擾性  血清膽紅素<250μmol/L、TG<18.2mmol/L、血紅蛋白<5.0g/L、抗壞血酸<55mg/dL時,對測定無顯著影響。

        6、 方法對照  用本測定試劑和某進口LDL-C測定試劑測定100例血清LDL-C含量,結果顯示相關系數>0.980。

        【注意事項】

        1、試劑變混濁或空白吸光度值>0.05時,將不能使用,應棄去;

        2、建議各實驗室建立自己的正常值范圍;

        3、試劑與樣本量可根據需要按比例調節;

        4、請勿用嘴直接吸取試劑,避免接觸皮膚、眼睛及粘膜,一旦接觸,應即用水沖洗污染部位;

        5、使用配套的校準品校準,校準周期為30天,更換試劑批號時需要重新校準。建議使用正常值和病理值生化質控血清進行室內質控,測定的控制值應在確定的限制范圍內,若控制值失控,實驗室應采取適當的糾正措施。

        6、不能將R1R2混成單試劑工作液。

        【參考范圍

        參考值范圍:2.07-3.10mmol/L

        建議各實驗室建立自己的正常參考值范圍。

        【儲存條件與有效期】

        未開封的試劑在2-8℃避光條件下可穩定12個月,置37℃水浴至少可穩定7天。

        試劑開封后,存放在分析儀試劑倉中(2-8)的試劑在30天內性質穩定。

        【參考文獻】

        1. Rifai N, Bachorik PS, Albers JJ. Lipids, lipoproteins and apolipoproteins. In: Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W.B Saunders Company; 1999. p. 809-61.

        2. Recommendation of the Second Joint Task Force of European and other Societies on Coronary Prevention  Prevention of coronary heart disease in clinical practice. Eur Heart J 1998;19: 1434-503.

        3. Bachorik PS. Measurement of low-density lipoprotein cholesterol. In: Rifai N, Warnick GR, Dominiczak MH, eds Handbook of lipoprotein testing. Washington: AACC Press,;1997.p.145-60.

        4. Schaefer EJ, McNamara J. Overview of the diagnosis and treatment of lipid disorders. In: Rifai N, Warnick GR, Dominiczak MH, eds. Handbook of lipoprotein testing Washington: AACC Press;1997.p.25-48

         


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