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        【特別推薦】:游離脂肪酸(NEFA)測定試劑使用說明、性能指標  
        發布者:idrfz.chen   
         

        (本試劑僅用于科研、實驗、技術支持,不直接應用于臨床診斷)

        【簡介】

        用于全自動生化分析儀測定人體血清游離脂肪酸含量。

        游離脂肪酸升高可見于一些病理狀態如胰島素抵抗/2型糖尿病、肥胖、惡性疾病和代謝綜合征,并會引發心血管疾病。

        【測定方法】

        酶法

        【測定原理】

        游離脂肪酸和輔酶A在乙酰輔酶A合成酶(ACS)的作用下反應生成乙酰輔酶A,乙酰輔酶A在乙酰輔酶A氧化酶的作用下成生HB2BOB2B,隨后通過Trinder底物在過氧化物酶(POD)的作用下生成有色產物,與標準比較后定量。

        【試劑盒組成】

         

            

            

            

        試劑

        液體雙試劑

        試劑Ⅰ:試劑Ⅱ=41

        4-氨基安替比林、酚衍生物、乙酰輔酶A合成酶、乙酰輔酶A氧化酶、輔酶A

        適量

        校準品

        液體1ml

        游離脂肪酸等

        見標簽

        【樣本要求】

        標本應空腹抽取,盡快分離血清測定。標本如不能及時測定,應于-20保存,避免反復凍融。肝素治療患者的血漿樣本不適合做分析。

        【測定步驟】

        1.本試劑為液體雙試劑,可直接使用。

        2.測定參數:波長:546nm;光徑:10mm;溫度:37。

        3.測定方法:

        加入物

        空白管

        標準管

        測定管

        試劑Ⅰ

        200

        200

        200

        蒸餾水(uL)

        4

        -

        -

        標準液(uL)

        -

        4

        -

        樣本(uL)

        -

        -

        4

        混勻,置37孵育5分鐘,讀取各管吸光度A1

        試劑Ⅱ(uL)

        50

        50

        50

        混勻,置37保溫5分鐘,讀取各管吸光度A2,計算ΔA=A2-A1

        4.上機參數:

          

        37

        血清+R1反應時間

        300

        樣本量

        4uL

          

        546nm

        試劑Ⅰ

        200uL

          

        660nm

        試劑Ⅱ

        50uL

        血清+R1+R2反應時間

        300

        5.計算:

        NEFA含量 mmol/L =  [(ΔA標本-ΔA空白)(ΔA標準-ΔA空白)]  × 校準品值

        【性能指標】

        1、 空白吸光度  0.300;

        2、 線性范圍 0-3.0mmol/L;

        3、 批內/分析內精密度  CV6%;批間相對極差 8%;

        4、 準確性  相對偏差不超過±10%。

        5、 抗干擾性  血清膽紅素<60mg/dL、TG<11.0mmol/L、血紅蛋白<2.0g/L、抗壞血酸<30mg/dL時,對測定無顯著影響。

        6、 方法對照  用本測定試劑和某進口試劑測定120例血清NEFA含量,結果顯示相關系數r = 0.991。

        【注意事項】

        1、試劑變混濁或空白吸光度值>0.300時,將不能使用,應棄去;

        2、建議各實驗室建立自己的正常值范圍;

        3、試劑與樣本量可根據需要按比例調節;

        4、請勿用嘴直接吸取試劑,避免接觸皮膚、眼睛及粘膜,一旦接觸,應即用水沖洗污染部位;

        5、使用配套的校準品校準,校準周期為15天,更換試劑批號時需要重新校準。建議使用正常值和病理值生化質控血清進行室內質控,測定的控制值應在確定的限制范圍內,若控制值失控,實驗室應采取適當的糾正措施。

        【參考范圍

        女性:0.10~0.45 mmol/L     男性:0.10~0.60mmol/L

        建議各實驗室建立自己的正常參考值范圍。

        【儲存條件與有效期】

        未開封的試劑在2-8℃避光條件下可穩定14個月,置37℃水浴至少可穩定7天。

        試劑開封后,存放在分析儀試劑倉中(2-8)的試劑在30天內性質穩定。

        【參考文獻】

        1、Ford RP.  Clin.Chem. 36 (33) :1073.

        2、Menéndez LG, Fernández AL, Enguix A. Ann Clin Biochem. 38(Pt 3):252-5

         


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