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        【特別推薦】:腺苷脫氨酶(ADA)測定試劑使用說明、性能指標  
        發布者:idrfz.chen   
         

         (本試劑僅用于科研、實驗、技術支持,不直接用于臨床診斷)

        【簡介】

        用于自動生化分析儀測定血清腺苷脫氨酶(ADA)活性。

        肝臟病—ADA活性是反映肝損傷的敏感指標,可作為肝功能常規檢查項目之一,與ALTGGTr-GT)等組成肝酶譜能較全面地反映肝臟病的酶學改變。血清中ADA活性的測定可①用于判斷急性肝損傷及殘留病變② 協助診斷慢性肝、 有助于肝纖維的診斷④ 有助于黃疸的鑒別。腺苷脫氨酶(ADA)在良惡性難辨的滲出液鑒別診斷上有重要價值。結核性胸腹水ADA活性顯著增高,癌性胸腹水不增高。此外,腦脊液ADA檢測可作為中樞神經系統疾病診斷和鑒別診斷的重要指標,結核性腦膜炎ADA活性顯著增高,病毒性腦炎不增高,顱內腫瘤及中樞神經系統白血病稍增高。

        【測定方法】

        PNP-XTO-POD偶聯連續監測法

        【測定原理】

        腺苷+H2 ADA >次黃苷+ NH4+

        次黃苷+Pi PNP >次黃嘌呤+核糖-1-磷酸

        次黃嘌呤XOD >尿酸+H2O2

        H2O2+4-AAP+酚衍生物POD >紅色醌衍生物+ H2O

        動態監測紅色醌衍生物的生成速率,可求得ADA活性。

        【試劑盒組成】

         

            

            

            

        試劑

        液體雙試劑,

        試劑Ⅰ:試劑Ⅱ=21

        緩沖液、4-AAP、PNP、XOD、POD、腺苷

        適量

        ADA校準品

        凍干1ml

        腺苷脫氨酶、穩定劑

        見標簽

        ADA質控品

        凍干1ml

        腺苷脫氨酶、穩定劑

        見標簽

        【樣本要求】

        不溶血血清、胸腹水。樣本中的腺苷脫氨酶在2-8℃可穩定7天,-20℃可保存30天。

        【測定步驟】

        1.本試劑為液體雙試劑,可直接使用。

        2.測定參數:波長:550nm;光徑:10mm;溫度:37℃。

        3.測定方法:

        加入物

        空白管

        校準管

        測定管

        試劑Ⅰ

        180

        180

        180

        蒸餾水(uL)

        5

        -

        -

        標準液(uL)

        -

        5

        -

        樣本(uL)

        -

        -

        5

        混勻,置37℃孵育1.5分鐘

        試劑Ⅱ(uL)

        90

        90

        90

        混勻,置37℃延滯5分鐘后讀取各管吸光度,每隔1分鐘讀1次,共讀3分鐘,計算平均每分鐘吸光度變化率ΔA/min

         

        4.上機參數:

          

        37

        延遲時間

        300

        樣本量

        5uL

          

        550nm

        試劑Ⅰ

        180uL

          

        800nm

        試劑Ⅱ

        90uL

        讀數時間

        180

         

        5.計算:

                     

        (ΔAU/min –ΔAB/min

        ADA活性(U/L)=                                 ×校準管活性

        (ΔAS/min –ΔAB/min

        【性能指標】

        1、 空白吸光度A550nm<0.05,空白吸光度變化速率ΔA/min0.0035;

        2、 測定試劑定標后K=2000左右。

        3、 線性范圍0-200 U/L (r >0.99);

        4、 批內/分析內精密度  CV5%;批間相對極差 7%;

        5、 準確性  相對偏差不超過±10%。

        6、 抗干擾性  膽紅素<40mg/dL、TG<1250mg/dL、血紅蛋白<500mg/dL、抗壞血酸<40mg/dL時,對測定無顯著影響。

        7、 方法對照  用本酶動力學測定試劑和某進口ADA連續監測法試劑盒 Adenosine DeaminaseTest Kit 測定50例血清ADA活性,結果顯示相關系數r = 0.994。

        【注意事項】

        1、試劑和樣品可因儀器要求不同,按比例增減,計算公式不變。

        2、試劑請放2-8℃儲存,避免冷凍、污染,否則將導致失效。

        3、當標本濃度超過檢測范圍時,應用生理鹽水稀釋標本后再進行檢測,標本值為測定值乘以稀釋倍數。

        4、請勿用嘴直接吸取試劑,避免接觸皮膚、眼睛及粘膜,一旦接觸,應即用水沖洗污染部位;

        5、使用使用本公司提供的校準品校準,校準周期為60天,更換試劑批號時需要重新校準。使用正常值和病理值生化質控血清進行室內質控,測定的控制值應在確定的限制范圍內,若控制值失控,實驗室應采取適當的糾正措施。

        【參考范圍

        成人  血清4 -20U/L37℃) 

        建議各地建立本地區的參考值范圍

        【儲存條件與有效期】

        未開封的試劑在2-8℃避光條件下可穩定12個月,置37℃水浴至少可穩定7天。

        試劑開封后,存放在分析儀試劑倉中的試劑在60天內性質穩定。

        【參考文獻】

        1Kelbel C,Stumpt B,Schmidt W,et al Role of Serum adenosine deamisnase as an immune parameter of tuberculosis,pneumoloqic,1995,49(12):684-688

        2.霍金山、程祺、郭錫侖等,血清腺苷脫氨酶活性對傷寒的診斷價值,中國實用內科雜志,1995,15(7):427-428

         


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