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        【特別推薦】:同型半胱氨酸檢測測定試劑使用說明、性能指標  
        發布者:idrfz.chen   
         

         (本試劑僅用于科研、實驗、技術支持,不直接用于臨床診斷)

        【簡介】

        用于體外定量測定人或血漿中同型半胱氨酸(HCY)的含量。

        同型半胱氨酸(HCY) 是心腦血管病的獨立危險因素。HCY又稱高半胱氨酸,是蛋氨酸的中間代謝產物。HCY水平與心腦血管疾病密切相關,HCY增高可刺激血管壁引起動脈血管損傷,導致炎癥和管壁斑塊形成,目前國內外已將HCY作為心腦血管疾病的常規檢測指標,用于預知動脈粥樣硬化的危險性。HCY升高還可引起神經管畸形及先天性畸形等出生缺陷類疾病。

        【測定方法】

        速率法

        【測定原理】

        絲氨酸+ 同型半胱氨酸    CBS    L-胱硫醚

        L-胱硫醚     CBL    同型半胱氨酸+丙酮酸+ NH3

        丙酮酸+ NADH     LD     乳酸+ NAD+

        在340nm波長下檢測吸光度下降速率,下降速率與樣本中HCY含量成正比。

        【試劑盒組成】

         

            

            

            

        試劑

        液體8:1

        乳酸脫氫酶 (LD);胱硫醚β-合成酶(CBS);胱硫醚β-分解酶(CBL);絲氨酸(SER);煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)

        適量

        【樣本要求】

        1、空腹采血,采血前不宜做劇烈運動。

        2、可用干燥管、肝素抗凝管采血加塞送檢。

        3、避免采用溶血、乳穈狀樣品。血液分離血清后2~8℃可穩定一周。

        【測定步驟】

        1、本試劑為液體雙試劑,可直接使用。

        2、測定參數:主/副波長:340nm/405nm;反應方向:負反應;反應時間:樣本與R1混勻后孵育

        3~5分鐘,加入R2孵育60秒后,讀取2分鐘內吸光度,求得每分鐘吸光度變化率△A/min。

        3、測定方法:

        加入物

        空白管

        校準管(S)/樣本管(T

        蒸餾水(uL)

        13

        -

        校準液/樣本(μl

        -

        13

        試劑Ⅰ(uL)

        200

        200

        混勻,37℃孵育35分鐘

        試劑Ⅱ(uL)

        25

        25

        混勻,37孵育60秒后,讀取2分鐘內吸光度,求得每分鐘吸光度變化率△A/min

        4、校準:校準類型為線性(linear), 建議采用試劑配套或具有溯源性的校準品。

        5、質量控制:建議每天采用正常和異常水平質控品進行內部質量控制。

        6、結果計算:HCY(μmol/L)=樣本△A/min /校準品△A/min×校準液濃度。

        【性能指標】

        1、靈敏度:濃度為28μmol/L的樣品,吸光度變化值(△A)應≥0.010。

        2、特異性:膽紅素<342μmol/L,甘油三酯<5.6mmol/L,血紅蛋白<2.0g/L,維生素C<0.3g/L對測定結果造成的干擾,偏倚在±15%內。

        3、試劑空白吸光度(A)≥1.0。

        4、準確性:測定定值質控品測值在控。

        5、線性范圍:(0~50.0)μmol/L,r2≥0.990。

        6、精密度:批內變異系數(CV)≤4%,批間變異系數(CV)≤6%。

        【檢驗方法的局限性】

        1、用于測定線性范圍內的樣品,如樣本超出線性,用生理鹽水稀釋后測定,結果乘稀釋倍數報告。

        2、溶血樣品對檢驗結果造成正偏差。

        【注意事項】

        1、 試劑、樣本比可根據儀器要求,按比例進行適當調整。

        2、 試劑中含防腐劑,避免接觸皮膚、內膜,如不慎接觸,即用大量流水沖洗。如不慎接觸眼睛或吞咽,立即找醫生救護。

        3、操作時須做好個人安全防護,預防樣本、試劑、校準品與人體直接接觸。

        4、開瓶用剩的試劑勿與新開瓶試劑混用,防止污染新開瓶試劑。

        5、建議每天測定試劑空白,試劑更換批次時須進行校準。

        6、試劑失效指標:試劑空白吸光度(A)<1.0,或產生沉淀、變色。

        【參考范圍

        (4.0-15.4)μmol/L;上述參考范圍僅供參考,建議各實驗室建立本實驗室參考值。

        【儲存條件與有效期】

        試劑密封避光存貯于28℃,有效期12個月,不能冰凍。開瓶后有效期1個月。

        【參考文獻】

        《全國臨床檢驗操作規程》,第三版。

         


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