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        【特別推薦】:甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)測定試劑使用說明、性能指標、上機參數  
        發布者:idrfz.chen   
         

         (本試劑僅用于科研、實驗、技術支持,不直接用于臨床診斷)

        簡介】

        本試劑僅供定量測定人血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶 (GPDA)的活性。

        原發性肝癌和繼發性肝癌病人血清GPDA活性升高。在血清AFP陰性和陽性的原發性肝癌病人中,血清GPDA升高的陽性率基本一致,而肝血管瘤病人的血清GPDA活性在正常范圍。70%以上的胃癌病人的血清GPDA明顯下降,胃癌切除后,病人血清GPDA呈回升趨勢。血清GPDA測定對鑒別肝臟良惡性病變、監測癌的肝轉移和胃癌的檢測 ,均具有意義。藥物性肝損害、原發性膽汁性肝硬變引起肝內膽汁郁積者,血清GPDA活性升高,臨床應用中應予注意。

        【測定方法】

        連續監測法

                                                       GPDA

        【測定原理】

        甘氨酰脯氨酰對硝基苯胺 ---------- 甘氨酰脯氨酸 + 對硝基苯胺

        反應產生的對硝基苯胺在405nm有最大吸收峰,測定吸光度上升的速率與GPDA的活性成正比。

        【試劑盒組成】

         

            

            

            

        試劑

        液體雙試劑31

        Tris緩沖液、甘氨酰脯氨酰對硝基苯胺

        適量

        GPDA質控品

        凍干1ml

        甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶、穩定劑

        見標簽

        【樣本要求】

        新鮮非溶血血清。樣品中的GPDA2-8°C時可保存2天;-20°C時可保存30天。

        【測定步驟】

        1.本試劑為液體雙試劑,可直接使用。

        2.測定參數:波長:405nm410nm;光徑:10mm;溫度:37℃。

        3.測定方法:

        加入物

        空白管

        測定管

        R1(uL)

        225

        225

        蒸餾水(uL)

        15

        --

        樣本量(uL)

        --

        15

        37℃保溫300s

        R2(uL)

        75

        75

        37℃延遲30s,測定90s內吸光度變化值△A,再計算每分鐘吸光度變化速率△A/min。

        4.上機參數:

          

        37

        延遲時間

        30

        樣本量

        15uL

          

        405nn410nm

        試劑Ⅰ

        225uL

          

        600nm

        試劑Ⅱ

        75uL

        讀數時間

        90

        理論K

        3241405nm)或3746410nm

         5.計算: 

        GPDA(U/L) =(AU/min-AB/min)×K

        消光系數: GPDA的摩爾消光系數為6749(405nm) 5606(410nm)。

        理論K值: 主波長為405nmK=3241;  主波長為410nmK=3746

        【性能指標】

        1、 空白吸光度A405nm<1.000,空白吸光度變化速率ΔA/min0.0035;

        2、 線性范圍0-600 U/L (r >0.99);

        3、 批內/分析內精密度  CV5%;批間相對極差 8%;

        4、 準確性  相對偏差不超過±10%。

        5、 抗干擾性  血清膽紅素<342umol/L、TG<11mmol/L、血紅蛋白<1000mg/dL、抗壞血酸<45mg/dL時,對測定無顯著影響。

        6、 方法對照  用本酶動力學測定試劑和Kojima.J等文獻等報道方法,進行相關性比較試驗測定30例血清GPDA活性,結果顯示相關系數r = 0.998。

        【注意事項】

        1、試劑和樣品可因儀器要求不同,按比例增減,計算公式不變。

        2、試劑請放2-8儲存,避免冷凍、污染,否則將導致失效。

        3、當標本濃度超過檢測范圍時,應用生理鹽水稀釋標本后再進行檢測,標本值為測定值乘以稀釋倍數。

        4、請勿用嘴直接吸取試劑,避免接觸皮膚、眼睛及粘膜,一旦接觸,應即用水沖洗污染部位;

        5、使用正常值和病理值生化質控血清進行室內質控,測定的控制值應在確定的限制范圍內,若控制值失控,實驗室應采取適當的糾正措施。

        【參考范圍

        成人  血清44-116 U/L37℃) 

        建議各地建立本地區的參考值范圍

        【儲存條件與有效期】

        未開封的試劑在2-8℃避光條件下可穩定12個月,置37℃水浴至少可穩定7天。

        試劑開封后,存放在分析儀試劑倉中的試劑在30天內性質穩定。

        【參考文獻】

        1.楊甲梅、吳孟起  中華醫學檢驗, 1990;131):2。     

        2.Takashi H,et at,Hepatology,1994; 191414。

         

        全自動生化分析儀參數

         日立7020參數

        參數號
        界面內容
        1
        分析項目GPDA
        2
        分析方法RateA
        4
        反應時間10
        5
        測光點122
        6
        測光點226
        9
        次波長600
        10
        主波長405
        11
        樣本量15
        12
        R1試劑量225
        13
        R1位置#
        14
        R1瓶尺寸L
        15
        R2量0
        16
        R2位置0
        17
        R2瓶尺寸0
        18
        R3量75
        19
        R3位置#
        20
        R3瓶尺寸S
        21
        校準模式linear
        23
        校準液Con.10
        24
        校準液pos.199
        25
        校準液Con.20
        26
        校準液pos.20
        27
        校準液Con.30
        28
        校準液pos.30
        29
        校準液Con.40
        30
        校準液pos.40
        31
        校準液Con.50
        32
        校準液pos.50
        33
        校準液Con.60
        34
        校準液pos.60
        36
        K1因數3241
        44
        偏移吸光度值999.9
        45
        離散允許吸光32000
        47
        S1ABS下限-32000
        48
        S1ABS上限32000
        49
        反應吸光度界32000
        50
        反應方向I
        54
        正常值下限44
        55
        正常值上限116

         

        日立7060/7080參數
        TEST NAMEGPDA
        ASSAY TYPERateA
        Wavelength(2nd/primary)600/405
        Time10
        Point20-24
        Sample vol15
        Reagent R1225
        Reagent R20
        Reagent R375
        Reagent R40
        Abs.limit32000
        Dec/incInc
        CAL.TYPElinear
        Point1
        Span point0
        STD(1)-Conc.pos0-water
        STD(n)-Conc.pos---
        SD limit999.9
        UnitU/L
        K-factor3241
         
        ,Abs.limit
        日立7170/7180/7600參數
        TEST NAMEGPDA
        ASSAY TYPERateA
        Wavelength(2nd/primary), ,
        600/405
        Time10
        Point20-24
        Sample vol15
        Reagent R1225
        Reagent R20
        Reagent R375
        Reagent R40
        32000
        Dec/incInc
        CAL.TYPElinear
        Point1
        Span point0
        STD(1)-Conc.pos0-water
        STD(n)-Conc.pos---
        SD limit999.9
        UnitU/L
        K-factor3241
         
        奧林帕斯系列
        Test NameGPDA
        Sample Volume15
        ReagentR1 Volume225
        R2 Volume75
        Wave-LengthPri410
        Sec600
        MethodRate
        Reaction Slope+
        Measuring Point 1:First/Last14-18
        Measuring Point 2:First/Last 
        Linearity30%
        No Lag-TimeYes
        Min OD  Max OD  L-H-2.5000-2.5000
        Reagent
        OD Limit
        Fst  L-H
        -2.50000
        ,
        Lst  L-H2.5000
        Dynamic Ranger    L-H0-600
        Calibration FactorA1
        B0
        Calibration  TypeMB
        FormulaY=AX+B
        ,
        Conc
        輸入校準品濃度
        MB Type Factor 
        BECKMAN-LX20
        ChemGPDA
        Reaction TypeRate1
        Reaction DirectionPositive
        UnitU/L
        Math ModleLinear
        Primary Wavelength410
        Secondary Wavelength600
        Cal.Time Limit0Hours
        K Factor7492
        First Inject VolA/225μl
        Secondary
        Inject Vol/Inject Time
        B/75μl/-180Sec
        Third Inject Vol/Inject TimeNone/0μl/0Sec
        Sample Volume15μl
        Reagent Blank Start Time-60
        End Read-40
        Reaction1 Start Time60
        End Read120
        Reaction2 Start Time 
        End Read 
        Usable Result Lower Limit0
        Upper Limit600
        Initial Rate99.999
        AEROSET/C-8000 /TBA120
        NameGPDA
        Reaction modeRate Up
        Primary wavelength404
        Secondary wavelength604
        Main read time19-23
        Flex read time18-22
        Blank read time 
        Last read time33
        Absorbance range0.000-2.800
        Sample blank type 
        Blank assay 
        Sample volume15
        R1 reagent volume225
        R1 water volume0
        R1 Dispense modeType0
        R2 reagent volume75
        R2 water volume0
        R2 Dispense modeType0
        Calibration methodLinear
        Calibration Level 1Water 0
        Calibration Level 2 
        Factor3241
        Blank absorbance range0.0000-0.5000
        Linearity range0-600
        Result concentration unitU/L
        Result decimal places0
        BECKMAN-CX系列
        Test NameGPDA
        Reaction TypeRate1
        Reaction DirectiomPositive
        UnitsU/L
        Decimal PrecisionX
        Calculation factor3746
        Math ModelLinear
        Primary Wavelength410
        Secondary Wavelength600
        Sample Volume15
        Primary Inject RgtA225
        Primary Inject RgtB75
        Secondary Inject RgtB 
        Add Time 
        Blank    Start Read300
        End Read316
                 Lowe Abs Limit-1.5
                 High Abs Limit1.5
        Recation  Start Read30
                 End Read90
                 Lowe Abs Limit-1.5
                 High Abs Limit1.5
        Usable Range Lower Limit0
                 Uppert Limit600
                 Initial99.9
                 Delta Abs1.5
         


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