（本試劑僅用于科研、實驗、技術支持，不直接用于臨床診斷） 【簡介】 本試劑盒用于測定血清中總膽固醇含量。 TC 增高：常見于動脈粥樣硬化、原發性高脂血癥 ( 如家族性高膽固醇血癥、家族性 ApoB 缺陷癥、多源性高膽固醇血癥、混合性高脂蛋白血癥等 ) 、糖尿病、腎病綜合征、總膽管阻塞、甲狀腺功能減退、肥大性骨關節炎、老年性白內障和牛皮癬。 TC 降低：常見于低脂蛋白血癥、貧血、敗血癥、甲狀腺功能亢進、肝臟疾病、嚴重感染、營養不良、腸道吸收不良和藥物治療過程中的溶血性黃疸及慢性消耗性疾病，如癌癥晚期等。 【測定方法】 氧化酶法 【測定原理】 血清中總膽固醇被膽固醇酯酶水解成游離膽固醇和脂肪酸，游離膽固醇被膽固醇氧化酶氧化生成△4-膽甾烯酮和過氧化氫，后者再參與Trinder反應生成紅色化合物，引起546nm處吸光度的上升，吸光度的變化與總膽固醇的含量成正比。 【試劑盒組成】 | 規 格 | 組 份 | 濃 度 | 試劑 | 液體雙試劑 試劑Ⅰ：試劑Ⅱ=4：1 | 4-氨基安替比林、酚衍生物、工具酶等 | 適量 | TC校準品 | 液體 | 膽固醇、穩定劑等 | 見標簽 |
【樣本要求】 不溶血血清或肝素抗凝血漿。樣本中的甘油三酯在2-8℃可穩定7天。 【測定步驟】 1.本試劑為液體雙試劑，可直接使用。 2.測定參數：波長：546nm；光徑：10mm；溫度：37℃。 3.測定方法： 加入物 | 空白管 | 校準管 | 測定管 | 試劑Ⅰ | 300 | 300 | 300 | 蒸餾水(uL) | 3 | - | - | 標準液(uL) | - | 3 | - | 樣本(uL) | - | - | 3 | 混勻，置37℃孵育5分鐘，讀取各管吸光度A1 | 試劑Ⅱ(uL) | 75 | 75 | 75 | 混勻，置37℃保溫5分鐘，讀取各管吸光度A2，計算ΔA=A2-A1 |
4.上機參數： 溫 度 | 37℃ | 血清+R1反應時間 | 300秒 | 樣本量 | 3uL | 主 波 長 | 546nm | 試劑Ⅰ | 300uL | 副 波 長 | 660nm | 試劑Ⅱ | 75uL | 血清+R1+R2反應時間 | 300秒 |
5.計算： TC含量 （mmol/L） = [（ΔA標本-ΔA空白）/ （ΔA校準-ΔA空白）] ×校準品值 【性能指標】 1、 空白吸光度 ≤0.050； 2、 線性范圍0-20.0mmol/L； 3、 批內/分析內精密度 CV≤5％；批間相對極差 ≤7％； 4、 準確性 相對偏差不超過±10％。 5、 抗干擾性 血清膽紅素<140μmol/L、血紅蛋白<5 g/L、TG<5.5mmol/L時，對測定無顯著影響。 6、 方法對照 用本測定試劑和日本第一化學株式會社TC測定試劑測定100例血清TC含量，結果顯示相關系數>0.980。 【注意事項】 1、試劑變混濁或空白吸光度值＞0.05時，將不能使用，應棄去； 2、建議各實驗室建立自己的正常值范圍； 3、試劑與樣本量可根據需要按比例調節； 4、請勿用嘴直接吸取試劑，避免接觸皮膚、眼睛及粘膜，一旦接觸，應即用水沖洗污染部位； 5、使用配套的校準品校準，校準周期為30天，更換試劑批號時需要重新校準。建議使用正常值和病理值生化質控血清進行室內質控，測定的控制值應在確定的限制范圍內，若控制值失控，實驗室應采取適當的糾正措施。 6、當標本濃度超過檢測范圍時，應用生理鹽水稀釋標本后再進行檢測，標本值為測定值乘以稀釋倍數。 7、可以將R1與R2混成單試劑工作液。 【參考范圍】 3.35-6.45mmol/L； 建議各實驗室建立自己的正常參考值范圍。 【儲存條件與有效期】 未開封的試劑在2-8℃避光條件下可穩定12個月，置37℃水浴至少可穩定7天。 試劑開封后，存放在分析儀試劑倉中(2-8℃)的試劑在30天內性質穩定。 【參考文獻】 1、UwajimaT,etal.AgrBiolChem.1974,38(6):1149. 2、UwajimaT,etal.AgrBiolChem.1976,40(10):197. 3、UwajimaT,etal.AgrBiolChem.1978,42(7):1453. 4、Richmond,W.Clinchem.19(1973).1350.
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