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        創燁生物:總膽固醇測定試劑使用說明、性能指標  
        發布者:idrfz.chen   
         

         (本試劑僅用于科研、實驗、技術支持,不直接用于臨床診斷)

        【簡介】

        本試劑盒用于測定血清中總膽固醇含量。

        TC 增高:常見于動脈粥樣硬化、原發性高脂血癥 ( 如家族性高膽固醇血癥、家族性 ApoB 缺陷癥、多源性高膽固醇血癥、混合性高脂蛋白血癥等 ) 、糖尿病、腎病綜合征、總膽管阻塞、甲狀腺功能減退、肥大性骨關節炎、老年性白內障和牛皮癬。

        TC 降低:常見于低脂蛋白血癥、貧血、敗血癥、甲狀腺功能亢進、肝臟疾病、嚴重感染、營養不良、腸道吸收不良和藥物治療過程中的溶血性黃疸及慢性消耗性疾病,如癌癥晚期等。

        【測定方法】

        氧化酶法

        【測定原理】

        血清中總膽固醇被膽固醇酯酶水解成游離膽固醇和脂肪酸,游離膽固醇被膽固醇氧化酶氧化生成△4-膽甾烯酮和過氧化氫,后者再參與Trinder反應生成紅色化合物,引起546nm處吸光度的上升,吸光度的變化與總膽固醇的含量成正比。

        【試劑盒組成】

         

            

            

            

        試劑

        液體雙試劑

        試劑Ⅰ:試劑Ⅱ=41

        4-氨基安替比林、酚衍生物、工具酶等

        適量

        TC校準品

        液體

        膽固醇、穩定劑等

        見標簽

        【樣本要求】

        不溶血血清或肝素抗凝血漿。樣本中的甘油三酯在2-8℃可穩定7天。

        【測定步驟】

        1.本試劑為液體雙試劑,可直接使用。

        2.測定參數:波長:546nm;光徑:10mm;溫度:37。

        3.測定方法:

        加入物

        空白管

        校準管

        測定管

        試劑Ⅰ

        300

        300

        300

        蒸餾水(uL)

        3

        -

        -

        標準液(uL)

        -

        3

        -

        樣本(uL)

        -

        -

        3

        混勻,置37孵育5分鐘,讀取各管吸光度A1

        試劑Ⅱ(uL)

        75

        75

        75

        混勻,置37保溫5分鐘,讀取各管吸光度A2,計算ΔA=A2-A1

        4.上機參數:

          

        37

        血清+R1反應時間

        300

        樣本量

        3uL

          

        546nm

        試劑Ⅰ

        300uL

          

        660nm

        試劑Ⅱ

        75uL

        血清+R1+R2反應時間

        300

         

        5.計算:

        TC含量 mmol/L =  [(ΔA標本-ΔA空白)(ΔA校準-ΔA空白)]  ×校準品值

        【性能指標】

        1、 空白吸光度 0.050;

        2、 線性范圍0-20.0mmol/L;

        3、 批內/分析內精密度  CV5%;批間相對極差 7%;

        4、 準確性  相對偏差不超過±10%。

        5、 抗干擾性  血清膽紅素<140μmol/L、血紅蛋白<5 g/L、TG<5.5mmol/L時,對測定無顯著影響。

        6、 方法對照  用本測定試劑和日本第一化學株式會社TC測定試劑測定100例血清TC含量,結果顯示相關系數>0.980。

        【注意事項】

        1、試劑變混濁或空白吸光度值>0.05時,將不能使用,應棄去;

        2、建議各實驗室建立自己的正常值范圍;

        3、試劑與樣本量可根據需要按比例調節;

        4、請勿用嘴直接吸取試劑,避免接觸皮膚、眼睛及粘膜,一旦接觸,應即用水沖洗污染部位;

        5、使用配套的校準品校準,校準周期為30天,更換試劑批號時需要重新校準。建議使用正常值和病理值生化質控血清進行室內質控,測定的控制值應在確定的限制范圍內,若控制值失控,實驗室應采取適當的糾正措施。

        6、當標本濃度超過檢測范圍時,應用生理鹽水稀釋標本后再進行檢測,標本值為測定值乘以稀釋倍數。

        7、可以將R1R2混成單試劑工作液。

        【參考范圍

        3.35-6.45mmol/L;

        建議各實驗室建立自己的正常參考值范圍。

        【儲存條件與有效期】

        未開封的試劑在2-8℃避光條件下可穩定12個月,置37℃水浴至少可穩定7天。

        試劑開封后,存放在分析儀試劑倉中(2-8)的試劑在30天內性質穩定。

        【參考文獻】

        1、UwajimaT,etal.AgrBiolChem.1974,38(6):1149.

        2、UwajimaT,etal.AgrBiolChem.1976,40(10):197.

        3、UwajimaT,etal.AgrBiolChem.1978,42(7):1453.

        4、Richmond,W.Clinchem.19(1973).1350.


         


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